Generación in silico de un constructo, para la expresión de la Proteína Morfogenética Ósea 11 (BMP11), en un vector del sistema de expresión de baculovirus tipo Bac-to-Bac

Abstract

La proteína morfogenética ósea 11 (BMP11) pertenece a la super familia del Factor de Crecimiento Transformante beta (TGF-β). Dicha proteína ha sido clonada solo una vez en vector plasmídico, pero nunca se ha realizado su clonaje en vectores de expresión de tipo viral, con el fin de expresarla de manera heteróloga en cultivos celulares (in vitro) con el sistema de baculovirus tipo Bac to Bac, por lo tanto, no se ha generado un constructo in silico que permita hacerlo en laboratorio a futuro. El objetivo del presente proyecto fue el diseño de un constructo pFastBac-HT-BMP11 correctamente mapeado, acompañado del diseño de iniciadores que permitan el clonaje direccional de la secuencia del gen BMP11, adaptada al uso de codones para que pueda llevarse a cabo el experimento en el laboratorio en células de Spodoptera frugiperda (Sf-9). Para llevar a cabo el clonaje, se usaron de manera alternativa los programas Serial Cloner v 2.6.1 y RF Cloning de uso gratuito, que permitieron el mapeo y el diseño del constructo con todos los parámetros adecuados para un posterior uso de los resultados en el laboratorio.